《古杂剧二十种》，亦名《顾曲斋元人杂剧选》，是明代万历年间刊刻的元明杂剧剧本选集，由明代著名戏曲理论家王骥德编纂，顾曲斋雕版刻印，为海内外公认为元杂剧研究领域至关重要的明代善本，现存足本庋藏于中国国家图书馆。
全书凡二十卷，一卷收录一种杂剧，合计收录完整杂剧二十种，剧目构成以元代杂剧为主，其中元人杂剧十七种，元末明初杂剧三种，囊括关汉卿、石子章、罗贯中、乔吉、李文蔚等十二位曲家作品。收录剧目包含关汉卿《望江亭中秋切鲙旦》、石子章《秦修然竹坞听琴》、罗贯中《宋太祖龙虎风云会》、乔吉《李英风送梧桐叶》、武汉臣《李云英风送梧桐叶》、尚仲贤《汉元帝孤雁汉宫秋》、乔吉《谢金莲诗酒红梨花》、白朴《唐明皇秋夜梧桐雨》等经典杂剧文本。
书卷首载《古杂剧序》，即图中所见行书序文，序文系统梳理中国韵文文体演变脉络，论述《诗经》、楚辞、汉五言诗、唐诗、宋词直至元曲一脉相承的文学源流，辨析杂剧文体兴起的渊源，阐明王骥德编纂此书的宗旨：有感于元代杂剧流传日久，文本传抄漫漶讹误，后世学人轻视杂剧文体，因此搜罗古本杂剧，甄选体制谨严、文辞典雅的作品汇刻，希冀保存元杂剧古法规范，树立杂剧文体的文学典范。序后接续《古杂剧目录》，逐一著录二十种杂剧名目，并清晰标注每一剧本的折目结构，承袭元杂剧四折一楔子的经典体制。正文部分完整保留杂剧曲词、宾白，文本底本多源自古传元本，文字内容与臧懋循《元曲选》等其他明刊杂剧选本互有异同，是校勘元杂剧文本不可缺少的核心参照。
此顾曲斋刻本具备鲜明的晚明建阳、徽州刊刻特征，版面规整，字体为流畅秀丽的行书与规整宋体相结合，部分剧目配套精美徽派版画插图，由徽州黄氏刻工操刀雕造，版画线条细腻，构图雅致，代表万历时期戏曲版画较高水准。在版式体例上，此书既恪守元杂剧分折体例，又可见明代传奇文体影响痕迹，部分文本标注用语杂糅，能够直观反映元杂剧入明之后在传播过程中发生的体制演变。
在戏曲文献史上，《古杂剧》与臧氏《元曲选》、孟称舜《古今名剧合选》鼎足而立。相较于后世大量经过明人删改润色的杂剧选本，《古杂剧》文本更多保留元代旧本面貌，不少杂剧仅依靠此本得以完整保存，拥有无可替代的文献校勘价值。同时，依托王骥德戏曲家的选录眼光，选目倾向文辞清丽、结构完整的文人杂剧，能够反映晚明曲家的戏曲审美标准。无论是研究元杂剧文本原貌、元明戏曲文体嬗变，考察明代戏曲刊刻文化、版画艺术，还是梳理王骥德戏曲理论思想，这部顾曲斋刻本《古杂剧二十种》都是核心一手文献。后世《古本戏曲丛刊》第四集即以此版本为底本进行影印流通，使这套珍本得以广泛供学界使用。